| 產(chǎn)品名稱 |
RMSC-bm-LUC |
| 商品貨號(hào) |
MZ-3344 |
| 中文名稱 |
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞-熒光素梅標(biāo)記 |
| 特征特性 |
間充質(zhì)干細(xì)胞是一類很有特性的細(xì)胞。它們有發(fā)育為成熟細(xì)胞的潛在能力而產(chǎn)生脂肪、軟骨、骨骼和肌肉。它們發(fā)育中的可塑性使人們對(duì)用間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)替換受損組織的潛在能力產(chǎn)生了極大的興趣。間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)，在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子作用下會(huì)分化成軟骨細(xì)胞。相反，在有血清、抗壞血酸和地塞米松的作用下會(huì)分化成成骨細(xì)胞。間充質(zhì)干細(xì)胞有潛能唄移植到受傷的部位或者種植到仿生支架上生長(zhǎng)形成適當(dāng)?shù)慕M織結(jié)構(gòu)。 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 培養(yǎng)條件 |
由 500 ml 基礎(chǔ)培養(yǎng)基、25 ml 胎牛血清、 5ml 間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)因子和 5ml 青霉素/ 鏈霉素溶液，分別包裝，使用時(shí)請(qǐng)按配比添加使用，配比 100：5：1：1。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。明舟生物按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 復(fù)蘇細(xì)胞步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
