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人臍靜脈平滑肌細(xì)胞

 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

1. 產(chǎn)品名稱:人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
2. 組織來(lái)源:臍帶組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4. 細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤(pán),臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤(pán)運(yùn)送給胎兒。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細(xì)胞基礎(chǔ);血管平滑肌細(xì)胞的異常增加的生長(zhǎng)潛力在血管疾病發(fā)生過(guò)程中起決定作用。由于臍帶是分娩過(guò)程中的廢棄物,同時(shí)從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細(xì)胞方法相對(duì)成熟,使得體外培養(yǎng)的臍靜脈平滑肌細(xì)胞作為研究血管的模型細(xì)胞。臍靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
明舟生物(mingzhoubio)生產(chǎn)的臍靜脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5. 培養(yǎng)基信息:
DMEM[H]、FBS、平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
明舟生物(mingzhoubio)推薦使用人臍靜脈平滑肌細(xì)胞專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)人臍靜脈平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)基。
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
在明舟生物(mingzhoubio)技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,人臍靜脈平滑肌細(xì)胞可傳3-5代左右,隨著傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)老化狀態(tài),生長(zhǎng)速度減緩,3代以內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)最佳;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。
5. 該細(xì)胞只可用于科研。
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考
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