用無卵黃胰蛋白胨亞硫酸鐵檸檬酸鹽杯絲氨酸瓊脂Shahidi和Ferguson多黏菌素卡那霉素亞硫酸鹽瓊脂或新莓素血瓊脂對系列稀釋物進行平板計數(shù)。對于SICA和 SFA瓊脂,既可采用加人lmL稀釋液后倒平板的方法（lOmL培養(yǎng)基），也可在預(yù)先干燥或倒好的平板上進行表面接種。新霉素血瓊脂平板應(yīng)預(yù)先倒好平板，干燥后進行表面接種。所有平板在35或37：厭氧培養(yǎng)24h在MCA和SFA瓊脂上，可疑產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌的菌落延黑色的（亞硫酸鹽還原 產(chǎn)生硫化鐵沉淀)。

 

 

在新霉素血(牛、馬或人血)瓊脂上，產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌的菌落產(chǎn)生-圏狹窄的完全溶血帶（形成毒素），在溶血帶外又形成一圏狹窄的非完全溶血帶挑選可疑的產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿搿菌落，穿刺接種至含有0.3%瓊脂的硝酸鹽蛋白胨水試管，也可以在Willis乳糖卵黃牛乳瓊脂上劃線接種,預(yù)先將幾滴產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿繭的抗毐崠噴灑每個平板的一半，干燥后，在整個平板上劃線接種。還可以將可疑菡落在血瓊脂平板上劃線。

 

 

將硝酸鹽瓊脂試管及Willis和fiobbs培養(yǎng)基置37厭氧培養(yǎng)24h。血瓊脂平板置 于37需氧培養(yǎng)24h培養(yǎng)后，觀察硝酸鹽瓊脂中菌體的生長情況(指菌體運動），并測試硝酸鹽的還原量選取Willis/Hobbs培養(yǎng)基上生長的菌株進行革蘭氏染色后鏡檢。產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌為革蘭氏染色陽性、不運動桿菌,并能還原硝酸鹽。

 

 

通過以下實驗進行驗證:觀察WmWHobbs培養(yǎng)基上的菌落——產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌在平板無抗毒素的部分，菌落周圍有一圈霧狀帶，在有抗毒素的區(qū)域不形成霧狀帶。另外該菌可發(fā)酵乳糖在血瓊脂需氧培養(yǎng)時，該菌不生長。