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嗜肺軍團(tuán)菌的檢測過程及預(yù)防方法!

 嗜肺軍團(tuán)菌是一種有鞭毛,革蘭氏陰性,軍團(tuán)菌屬多形態(tài)性的短小球桿菌。嗜肺軍團(tuán)菌不抗酸,無孢子,無莢膜,類似于桿菌。不能分解明膠、糖類或尿素,不可參加酵解反應(yīng)。嗜肺軍團(tuán)菌無色,也非自身熒光。氧化酶與過氧化氫酶測試呈陽性,為β-內(nèi)酰胺酶陽性。專性需氧,在自然界可長期存活,如在蒸餾水中可存活100d以上,污水中可存活一年,對熱和一般消毒劑敏感。菌落特征為灰白色,有光澤,濕潤,圓形,凸起,并有特殊臭味。革蘭氏染色不明顯,多用鍍銀法或Giemsa法染色。

 
 
 
衛(wèi)生部于2006年頒布了《公共場所集空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生管理辦法》、《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》,規(guī)定對集中空調(diào)系統(tǒng)冷卻水和冷凝水作出了嗜肺軍團(tuán)菌“不得檢出”的規(guī)定。
 
 
 
流行病學(xué)研究闡明,冷凝塔、加濕器及風(fēng)管等是病原體的來源,空氣及氣溶膠是病原體的傳播媒介。夏季和秋季是軍團(tuán)菌最適宜生長的季節(jié),也是發(fā)病率最高的季節(jié)。
 
 
 
軍團(tuán)菌的檢測軍團(tuán)菌因為個體小,生長緩慢,難檢出,并具有傳染性,對檢測實驗室和實驗人員的操作有相當(dāng)高的要求。近日,我要測工作人員聯(lián)系了廣州工業(yè)微生物檢測中心,了解了嗜肺軍團(tuán)菌的檢測方法及檢測過程:
 
 
 
國內(nèi)外的軍團(tuán)菌檢測方法主要依據(jù) ISO11731-1:1998;ISO 11731-2:2004(E)、《軍團(tuán)菌的檢測和計數(shù)》及《公共場所集空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生管理辦法》。定性測試兩種方法的檢測步驟大致相同,基本包括以下步驟:
 
1、采樣及運送
采樣容器可為無菌玻璃瓶,聚乙烯瓶或無菌采樣袋,并且瓶口或袋口能密封;采樣量一般在300-400ml 左右,如果經(jīng)過氯或臭氧消毒的水,采樣后加入少量硫代硫酸鈉溶液,以中和樣品中的氧化物;采樣至送達(dá)實驗室最長時間不得超過2天。
 
2、樣品處理
對含少量軍團(tuán)菌的樣品一般用薄膜過濾法來濃縮樣品的濃度,如有雜質(zhì)的樣品可靜置沉淀或離心過濾去除,并對樣品進(jìn)行熱處理和酸處理以減少非軍團(tuán)菌的生長。
 
3、接種和培養(yǎng)
軍團(tuán)桿菌在分類學(xué)上是一種獨特的需氧革蘭氏陰性桿菌,無莢膜,在普通培養(yǎng)基上不生長,屬于細(xì)胞內(nèi)寄生菌。目前標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基為活性碳酵母浸膏瓊脂平板,也稱軍團(tuán)菌生長平板(BCYE)。接種在 BCYE 平板上的樣品在溫度為35-37ºC,培養(yǎng)10天,在濃度為2.5% CO2 的環(huán)境下培養(yǎng)更有利于軍團(tuán)菌的生長。軍團(tuán)菌的菌落通常呈白色、灰色、有熒光。
 
4、軍團(tuán)菌的鑒定
挑取至少3個疑似軍團(tuán)菌的菌落接種至軍團(tuán)菌生長 BCYE 平板和半光氨酸缺失的 BCYE-Cys 平板,在35-37ºC條件下培養(yǎng)至少5天,凡是在 BCYE 平板上生長而在平板和半光氨酸缺失 BCYE-Cys 平板上不生長,并且血清學(xué)陽性的的則判為軍團(tuán)菌。
 
嗜肺軍團(tuán)菌的預(yù)防
 
第一,對軍團(tuán)菌主要滋生地 -- 中央空調(diào)系統(tǒng)、冷熱水循環(huán)系統(tǒng)、冷凝脫水盤、空氣加濕器等進(jìn)行定期清潔處理。定期更換冷卻水和冷凍水,避免貯存水長期滯留,保證空調(diào)系統(tǒng)注入水的潔凈,必要時采取殺菌殺藻等消毒措施;定期清洗空調(diào)冷卻塔及管道,對大型建筑物的中央空調(diào)系統(tǒng)要定期使用消毒抑菌劑清潔。
 
第二,使用空調(diào)(包括冬天使用暖空調(diào))的房間應(yīng)經(jīng)常開窗通風(fēng),經(jīng)常保持室內(nèi)環(huán)境的衛(wèi)生和空氣流通,有條件的話對室內(nèi)空氣進(jìn)行凈化和殺菌處理。
 
第三,使用空調(diào)期間,一旦出現(xiàn)發(fā)燒、咳嗽、胸痛、呼吸不暢,不應(yīng)只考慮“感冒”,應(yīng)及時就診檢查,警惕軍團(tuán)菌病。只要早期發(fā)現(xiàn)及時治療,效果較好。
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